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本生知識(shí)點(diǎn)—ELISA樣本分析及實(shí)驗(yàn)原理

更新時(shí)間:2023-03-20    點(diǎn)擊次數(shù):604

  本生知識(shí)點(diǎn)—ELISA樣本分析及實(shí)驗(yàn)原理


  elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:

  試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中產(chǎn)品水平。用純化的其抗體包被微孔板,制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品,再與HRP標(biāo)記的其抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中產(chǎn)品的濃度。

  elisa試劑盒種屬:人,大鼠,小鼠,雞,鴨,魚,貓,馬,豬,兔,倉(cāng)鼠,豚鼠,裸鼠,植物等elisa試劑盒。

  ELISA樣本分析:

  1.回溫平衡:

  在加樣之前約半小時(shí)左右,把試劑盒從冰箱中取出,放置在室溫下進(jìn)行平衡,平衡到用手握住試劑瓶感覺(jué)到不涼為止。如果時(shí)間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進(jìn)行快速回溫。

  2.反應(yīng)時(shí)間:

  盡量把時(shí)間控制在需要的反應(yīng)時(shí)間,如果時(shí)間比較緊迫的話也可以把時(shí)間稍微延長(zhǎng)幾分鐘,但不宜太長(zhǎng)。顯色時(shí)間可根據(jù)顏色深淺進(jìn)行調(diào)整。

  3.加樣:

  取出相應(yīng)數(shù)量的微孔板放置在板架上,然后再對(duì)板孔進(jìn)行編號(hào),再對(duì)需要稀釋的抗體或酶標(biāo)記物進(jìn)行稀釋。在板孔的前六個(gè)孔內(nèi)分別加入標(biāo)準(zhǔn)品1-6,然后在剩下的板孔內(nèi)加入樣品分析液。然后再在每孔內(nèi)加入其余需要加入的液體。蓋上蓋板膜以后小幅度振蕩,然后放置在相應(yīng)的環(huán)境中進(jìn)行反應(yīng)。如是25℃環(huán)境反應(yīng),則可放置在空調(diào)房?jī)?nèi)進(jìn)行反應(yīng);如果是37℃環(huán)境下反應(yīng),則必須放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱里進(jìn)行反應(yīng),如果是4℃環(huán)境下反應(yīng),則必須放置在2-8度冰箱里進(jìn)行培養(yǎng)。

  4.洗板:

  把板內(nèi)液體甩干,加入稀釋好的洗液250ul/孔,靜置10s或稍作振蕩后甩掉孔內(nèi)液體,再次加入洗液,以此重復(fù)3-4遍,洗完以后利用吸水紙把孔內(nèi)液體充分拍干后進(jìn)行下一步操作,如果孔內(nèi)有氣泡,則利用干凈的槍頭刺破。

  5 結(jié)束實(shí)驗(yàn):

  把加樣槍全部調(diào)到zui大量程,試劑盒放入冰箱,試管及離心管進(jìn)行清洗,關(guān)閉不用的儀器.

  ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。


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